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Was versteht man unter der Hellfeldmikroskopie?

Zusammenfassung

Die Hellfeldmikroskopie ist eine der ältesten und am weitesten verbreiteten Techniken unter Forscher:innen und Mediziner:innen. Das Bild in einem Hellfeldmikroskop entsteht, indem das Licht durch die Probe fällt und ein helles Bild vor dunklem Hintergrund erzeugt. Das Mikroskop hat bei der Entdeckung von Zellen, Mikroorganismen, Viren und Krebs geholfen und wurde auch bei der Entwicklung der Genetik eingesetzt. Zu seinen Vorteilen zählen Einfachheit und Vielseitigkeit, die Betrachtung detaillierter Bilder, eine zerstörungsfreie Technik und die Kompatibilität mit anderen Techniken. In diesem Artikel erfahren Sie mehr über das Mikroskop und seine Vorteile und Grenzen.

Einleitung

Eine der ältesten und am häufigsten verwendeten Technik in der Mikroskopie ist die Hellfeldmikroskopie. Sie ermöglicht es lebenden Zellen, Gewebe und anderen biologischen Proben zu Bildungs- und Forschungszwecken zu betrachten. Der Name „Hellfeld“ bezieht sich auf die Tatsache, dass das Bild mit Hilfe des Lichts entsteht, das durch das Präparat fällt und ein helles Bild vor dunklem Hintergrund erzeugt. Diese Technik wird auch zur Erforschung vieler Themen in Biologie und Medizin eingesetzt. Das Grundprinzip der Hellfeldtechnik ist einfach, die Geräte sind nicht teuer und ermöglichen eine Betrachtung, die die Qualität des Präparats nicht beeinträchtigt. Im Allgemeinen kann die Hellfeldmikroskopie bei der Erforschung von Zellen, Geweben und anderen biologischen Proben eingesetzt werden. Sie kann aber auch bei der Betrachtung und Erforschung von nicht-biologischen Materialien wie verschiedenen Arten von Mineralien und Metallen sehr hilfreich sein.

Living organisms through a microscope
Lebende Organismen durch ein Mikroskop (links nach rechts – Planze, Blut, Kieselgur, menschliches Gewebe)

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Leichte und einfache Technik

Forscher:innen oder Mediziner:innen benötigen in der Regel eine Lichtquelle, eine Kondensorlinse, eine Objektivlinse und eine Okularlinse. Typischerweise dient eine Halogenlampe als Lichtquelle. Das Licht wird durch die Kondensorlinse geleitet, die das Licht auf das Präparat fokussiert. Die Objektivlinse befindet sich unter dem Präparat. Sie vergrößert das Bild und projiziert es durch die Okularlinse nach oben. Sie vergrößert das Bild für die Betrachter:innen weiter.

Principle of brightfield microscopy
Prinzip der Hellfeldmikroskopie

Grundlegendes Werkzeug in Biologie und Medizin

Die Hellfeldmikroskopie war maßgeblich an wichtigen Entdeckungen beteiligt. Einige dieser Entdeckungen sind:

Entdeckung der Zellen: Dank der Erfindung des Mikroskops durch Anton van Leeuwenhoek im 17. Jahrhundert wurde es möglich, Zellen zu beobachten und zu erforschen. Dies führte im 17. Jahrhundert zur Entwicklung der Hellfeldmikroskopie und der Zelltheorie, einer der grundlegenden Theorien der Biologie.
Entdeckung der Mikroorganismen: Bakterien und Protozoen waren einige der Mikroorganismen, die mit Hilfe der Hellfeldmikroskopie beobachtet und untersucht wurden. Diese Mikroorganismen waren zuvor für das bloße Auge unsichtbar. Dies führte zu einer neuen Wissensbasis über die Rolle von Mikroorganismen bei Krankheiten und die Entwicklung der Biologie im Allgemeinen.
Entdeckung der Viren: Viren, noch kleiner als Bakterien, galten als nicht lebendig. Mit Hilfe der Hellfeldmikroskopie war es möglich, diese Mikroorganismen zu untersuchen und zu beobachten und die Rolle von Viren bei Krankheiten besser zu verstehen.
Organellen: Die Technik der Hellfeldmikroskopie wurde auch zur Untersuchung der inneren Struktur von Zellen, den so genannten Organellen, eingesetzt. Mithilfe der Hellfeldmikroskopie lernten die Forscher die Mitochondrien, den Zellkern und das endoplasmatische Retikulum kennen. Die Hellfeldmikroskopie half den Forschern, die Rolle der Organellen bei der Zellfunktion zu verstehen.

Entwicklung der Genetik: Die Hellfeldmikroskopie hatte großen Einfluss auf die Entwicklung der Genetik. Sie ermöglichte es Forschern und Medizinern, Chromosomen, das genetische Material der Zellen, zu beobachten. Die Entwicklung der Genetik führte zu einem besseren Verständnis der Rolle der Gene bei der Untersuchung von Vererbung und Merkmalen.
Entdeckung von Krebs: Die Hellfeldmikroskopie erleichterte es, die Ursachen und die Struktur von Krebserkrankungen besser zu verstehen. Sie half auch bei der Entwicklung von Behandlungen wie Chemo- und Strahlentherapie.

A normal male karyotype
Ein normaler männlicher Karyotyp mit 22 Paaren autosomaler Chromosomen und einem Paar Geschlechtschromosomen. (Quelle: National Cancer Institute (https://www.cancer.gov))

Wenn man all diese Entdeckungen sieht, kann man leicht zu dem Schluss kommen, dass die Hellfeldmikroskopie ein grundlegendes Instrument in Biologie und Medizin ist, das hilft, Organismen auf zellulärer und molekularer Ebene besser zu verstehen.

Hellfeld-Mikroskopie: Vorteile und Nachteile

Die Hellfeldmikroskopie ist für ihre Einfachheit bekannt. Es werden keine speziellen Farbstoffe oder Färbemittel benötigt, und es ist keine besondere Ausrüstung erforderlich. Daher ist diese Technik kostengünstig und leicht zugänglich, was sie ideal für den Einsatz in Ausbildung und Forschung macht.

Weitere Vorteile sind

Detaillierte Bilder: Hochauflösende Bilder, ideal für detaillierte Beobachtungen.
Vielseitigkeit: Die Hellfeldmikroskopie kann nicht nur für verschiedene biologische Materialien wie Gewebe, Zellen und andere Proben verwendet werden, sondern auch für nicht-biologische Materialien wie Mineralien und Metalle.
Nicht-destruktive Proben: Es handelt sich um eine zerstörungsfreie Technik, d. h. die Probe wird während des Bildgebungsverfahrens nicht beschädigt oder verändert. Außerdem kann die Probe mehrfach untersucht werden.
Verfügbarkeit: Für die Hellfeldmikroskopie sind einfache und kostengünstige Geräte erforderlich. Sie ist für Forscher und Ausbilder leicht zugänglich.
Kompatibilität mit anderen Techniken: Die Technik der Hellfeldmikroskopie kann problemlos mit anderen Verfahren wie der Fluoreszenz- oder Elektronenmikroskopie kombiniert werden, wenn der Forscher oder Mediziner eine höhere Bildqualität erzielen oder mehr Daten aus der Probe gewinnen möchte.

Advantages of Brightfield Microscopy
Vorteile der Hellfeldmikroskopie

Andere Benachteiligungen

Allerdings gibt es auch einige Nachteile. Einer der Hauptnachteile der Hellfeldmikroskopie ist, dass sie keine Strukturen oder Moleküle erkennen kann, die kein Licht absorbieren oder streuen. Es kann auch schwierig sein, zwischen verschiedenen Strukturen zu unterscheiden, die sich in unterschiedlichen Tiefen des Präparats befinden. Dies kann bei der Arbeit mit transparenten oder halbtransparenten Proben recht problematisch sein. Um dieses Problem zu lösen, wurden verschiedene Varianten der Hellfeldmikroskopie entwickelt. Eine der am weitesten verbreiteten ist die Phasenkontrastmikroskopie, die erstmals in den frühen 1930er Jahren eingesetzt wurde. Das Kontrastmikroskop verwendet eine spezielle Linse, um den Kontrast zwischen transparenten und halbtransparenten Proben zu erhöhen. Dabei kommt es zu einer Phasenverschiebung des Lichts, das durch das Präparat fällt. Die Dunkelfeldmikroskopie wird seit Anfang des 20. Jahrhunderts eingesetzt. Sie ist eine weitere Variante der Hellfeldmikroskopie, die in den letzten Jahren an Popularität gewonnen hat. Die Lichtquelle beleuchtet das Präparat nicht direkt, sondern reflektiert es in das Objektiv. Das so erhaltene Bild erscheint dunkel, mit hellen Flecken an den Stellen, an denen das Licht von der Probe reflektiert wird. Es ist besonders nützlich, wenn ein Forscher kleinere, transparente Proben oder Mikroorganismen beobachten muss.

Fazit

Die Hellfeldmikroskopie ist eine sehr nützliche Technik und sehr hilfreich für Forscher und Mediziner, die Zellen, Gewebe und andere biologische Präparate untersuchen müssen. Diese Technik ist einfach, kostengünstig und leicht zugänglich, hat aber auch ihre Grenzen. Um diese Einschränkungen zu überwinden, wurden verschiedene Varianten wie Fluoreszenz- oder Dunkelfeldbeleuchtung entwickelt. Bei der Phasenkontrastmikroskopie wird eine spezielle Linse verwendet, um den Kontrast zwischen transparenten und halbtransparenten Proben zu erhöhen. Die Dunkelfeldmikroskopie ist vor allem für die Beobachtung kleinerer oder transparenter Proben geeignet. Beide Varianten haben sich als sehr hilfreich erwiesen, um ein Höchstmaß an Effizienz und Arbeitsqualität zu erreichen. Die Digitalmikroskope von PreciPoint bieten ebenfalls mehrere Vorteile. Das O8 oil Digitalmikroskop und der Slide Scanner dienen sowohl als Digitalmikroskop als auch als Scanner und bieten völlig neue Möglichkeiten für Ihren Arbeitsablauf.